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          行業(yè)新聞

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          磁翻板液位計(jì)精確的液位控制有助于基礎(chǔ)癌癥研究

          作時間:2019-04-27 15:31:11   來源:  作者:

              “基礎(chǔ)癌癥研究的主要目的是揭示正常細(xì)胞和癌細(xì)胞之間的差異。這些差異可能會被用于尋找特定癌癥的脆弱性:任何專門針對癌癥細(xì)胞的貿(mào)易都可能為我們提供如何攻擊癌細(xì)胞的線索,同時保持健康細(xì)胞不受影響“,Dr。教授解釋道。荷蘭阿姆斯特丹癌癥研究所(NKI)的Kees Jalink 。

              今天教授博士。Kees Jalink分享了他關(guān)于NKI(荷蘭癌癥研究所)正在研究的“生物物理學(xué)和先進(jìn)成像組”以及流量計(jì)和控制器在他們研究中的作用的研究。
          NKI的生物物理學(xué)和先進(jìn)成像組
              解開正常細(xì)胞和癌細(xì)胞之間的這些差異已被證明是一項(xiàng)艱巨的任務(wù),因?yàn)榇蠖鄶?shù)癌細(xì)胞的健康細(xì)胞為99.9%。在生物物理學(xué)和先進(jìn)成像組,我們使用先進(jìn)的顯微技術(shù)放大細(xì)胞,包括活細(xì)胞成像,熒光顯微鏡和“功能成像”技術(shù)。在后者中,使用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET),光漂白后熒光恢復(fù)(FRAP)和熒光相關(guān)光譜等技巧來提取有關(guān)蛋白質(zhì)(生物分子)及其在單個活癌細(xì)胞中的相互作用的信息。
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          活細(xì)胞產(chǎn)生更多信息
              不久前,為了通過高分辨率顯微鏡進(jìn)行可視化,通常將細(xì)胞殺死,固定,染色以獲得特定成分并嵌入樹脂中。然而,成像活細(xì)胞產(chǎn)生更多信息:
          活細(xì)胞可能經(jīng)過分裂
          遷移
              相互作用形成緊密的單層,就像我們體內(nèi)的活細(xì)胞(癌癥)一樣。只有活細(xì)胞,我們才能掌握內(nèi)部生化過程的動態(tài)。
              我們提供一系列有色熒光蛋白(圖1),可以標(biāo)記單一蛋白質(zhì)種類,并了解我們想要了解的蛋白質(zhì)。訣竅是,在顯微鏡上保持這些細(xì)胞的活力和健康。
              在顯微鏡下,將細(xì)胞保存在裝有DMEM培養(yǎng)基的玻璃底皿中:一種含有維生素和營養(yǎng)素的血漿樣鹽溶液。在早期,我們只是保留它們在室溫下在培養(yǎng)皿中的自由空氣(約20%氧氣2,80%N 2,0.05%CO 2)。然而,這根本不能模仿我們體內(nèi)的氣氛,因此結(jié)果并不像預(yù)期的那樣。
              例如,細(xì)胞通常拒絕分裂,大多數(shù)細(xì)胞在1-2天后死亡。而且,培養(yǎng)基中pH的控制幾乎不可能。因此,我們需要建立一個專用的培養(yǎng)箱,容納細(xì)胞和大部分顯微鏡。在這個培養(yǎng)箱中,空氣需要加熱到37°C,保濕,大氣必須與空氣不同:
          它必須包含至少5%CO 2
              并且氧氣的百分比必須在~2%和20%之間調(diào)節(jié)
              這類似于身體中遇到的各種氧氣張力。例如,眾所周知,實(shí)體瘤是缺氧的(含有少于幾個%的O 2),這完全改變了細(xì)胞的生理學(xué),以及它們對抗癌藥物的反應(yīng)。
          但如何實(shí)現(xiàn)精確的大氣控制?
              在展覽中,我們了解了Bronkhorst及其磁翻板液位計(jì)和控制器。在Bronkhorst Nederland的協(xié)助下,我們選擇了EL-FLOW Select系列的三個磁翻板液位計(jì),并將它們連接到我們實(shí)驗(yàn)室中存在的壓縮CO 2,N 2和空氣的出口。
              其余的很簡單:通過磁翻板液位計(jì)調(diào)整相對氣流,我們現(xiàn)在可以將CO 2,N 2和O 2水平設(shè)置為所有相關(guān)值。這些范圍對于氧氣為2-19%,對于CO 2為0-20%,對于氮?dú)鉃?0-100%。
              從那以后,我們在這樣的受控條件下進(jìn)行了所有實(shí)驗(yàn),結(jié)果更加一致 - 而且由于這個孵化器而更加相關(guān)。我們用它來研究癌細(xì)胞在轉(zhuǎn)移過程中如何遷移,以及它們?nèi)绾未┩钙渌?xì)胞層并在這個“利基”中生存。我們還用它來探索細(xì)胞如何使用化學(xué)信號相互通信,以及如何在細(xì)胞內(nèi)接收和隨后處理這些信號。
          μ-Flow液體磁翻板液位計(jì)開始拯救
              隨著科學(xué)的發(fā)展,解決一個問題導(dǎo)致了另一個問題的識別。我們注意到在37°C時,培養(yǎng)基蒸發(fā)得更快,幾天后細(xì)胞就會干燥,除非我們將成像盤緊閉。但這限制了細(xì)胞的進(jìn)入,這使得在實(shí)驗(yàn)過程中不可能為我們的研究添加生長因子,激素或抗癌藥物。
              保濕空氣僅部分解決了這一問題,因?yàn)樵诟邼穸认聲纬衫淠,可能會損壞我們設(shè)置中的敏感電子設(shè)備,因此我們必須保持低于60%的相對濕度。同樣,磁翻板液位計(jì)提供了簡單可靠的解決方案。我們?yōu)橐后w選擇了μ-FLOW磁翻板液位計(jì),以提供非常穩(wěn)定的去離子水流。使用本地BRIGHT控制器使用PiPS(插入式電源),我們可以控制每分鐘0.5到9.6微升的水流量。
              根據(jù)經(jīng)驗(yàn),我們發(fā)現(xiàn)閥門調(diào)整到1.3 ul / min時,我們完全補(bǔ)償了蒸發(fā),現(xiàn)在我們能夠在顯微鏡下保持細(xì)胞存活數(shù)周。該系統(tǒng)維護(hù)成本非常低:只需安裝即可忘記,以便我們專注于我們的核心業(yè)務(wù)。磁翻板液位計(jì)在構(gòu)建顯微鏡培養(yǎng)箱和細(xì)胞方面起著關(guān)鍵作用,它們快速地分裂和發(fā)育。
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